紫外_8
时间:2019-03-01 20:30:57 来源:时时彩平台代理 作者:匿名


1.紫外 - 可见吸收光谱

可以在入射光的每个波长通过样品溶液之后测量吸光度值A.以波长作为横坐标并绘制相应的吸光度A作为纵坐标,可以获得吸收光谱。现在,许多仪器可以在整个波长或选定的波长范围内直接扫描样品溶液。

吸收光谱也称为吸收曲线。从图8-8可以看出吸收光谱的特征:曲线1的峰值称为最大吸收峰值,与之对应的波长称为最大吸收波长(λmax),并且有一个小的锯齿形在高峰旁边(3个地方))被称为肩膀,许多物质没有肩膀;曲线2处的峰和谷对应于最小吸收波长(λmin); 5是第二吸收峰;在吸收曲线的末端,吸收是等效的。强但未达到峰值的部分(4个位置)称为末端吸收。物质处于吸收光谱中。由于特殊的分子结构,一些物质会有几个吸收峰。在λmax处,它是由电子能级跃迁吸收的特征波长。不同物质有不同的最大吸收峰,有些物质有不同没有吸收峰。 λmax,λmin肩峰和光谱上整个吸收光谱的形状由物质的性质决定,其特性随物质的结构而变化,因此它是物质定性的基础。

二,光度条件的选择

(1)入射光波长的选择

进行样品溶液定量分析时的关键问题是如何选择合适的检测波长。将样品溶解在合适的溶剂中以制备合适的浓度,并在紫外 - 可见分光光度计上扫描以获得紫外 - 可见吸收光谱曲线。通常,应选择被测物质的吸收光谱中的吸收峰处的波长作为测量波长,以提高灵敏度并减小测量误差。如果被测物体具有多个吸收峰,则可以通过使用不易被其他物质干扰的较高(吸收系数百分比)和宽吸收峰值波长来确定。例如,核黄素在200至600nm处具有四个吸收峰(图8-9)。它在265nm处具有最高的吸收强度,但它偏向于短波长区域并且在样品溶液中易受杂质干扰。另一方面,265nm处吸收峰的上/下斜率处的吸光度随波长变化很大,因此不适合。作为检测波长,通常选择444nm波长进行定量分析,尽管灵敏度较差,但杂质干扰较小。此外,有关双波长或多波长分光光度法测量波长的选择,请参阅下面的“计算分光光度法简介”。

(II)溶剂的选择和处理溶剂的性质对溶质的吸收光谱的波长和吸收系数有影响。极性溶剂的吸收曲线相对稳定且廉价,因此在分析中,水(或一定浓度的酸,碱和缓冲液)和极性溶剂如醇通常用作测量溶剂,但极性溶剂如因为使用水和酒精。这将导致吸收峰的位置和宽度发生变化,使用时应注意这一点。用于确定样品吸光度的溶剂应该能够完全溶解样品并且在所使用的波长范围内具有良好的透光性,即,它不吸收光或吸收弱。许多溶剂在紫外区域具有吸收峰,并且只能用于较弱的吸收带。表8-4列出了溶剂的波长限制。当使用的波长低于溶剂的极限波长时,应考虑其他溶剂。或者改变测量波长。

分光光度法需要“光谱纯度”溶剂或经过测试以满足要求的空白。烃溶剂可以通过硅胶或氧化铝吸附或化学处理以除去杂质。以下简要描述几种主要溶剂的处理或预防措施。

(1)蒸馏水

蒸馏水在210至700nm的波长范围内没有吸收,因此应用范围广,并且限制是大多数有机化合物不溶于水。使用前,悬浮在水中的微小气泡必须事先煮沸,否则气泡引起的散射光会引起误差。

(2)乙醇

精制乙醇的最终吸收波长为215nm。在乙醇中经常存在醛杂质(吸收峰值为约290nm),可以首先加入1%氢氧化钠和少量硝酸银,然后回流1小时。 95%乙醇是常用溶剂,市售无水乙醇通常含有微量的苯,其在紫外区域具有吸收性,使用时需要注意。

参考:现代食品检测技术

关键词:紫外 - 可见分光光度法,食品检测,定性,定量,国家标准物质网络

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